內(nèi)皮細胞位于血管內(nèi)腔表面,形成一層連續(xù)的單層細胞屏障。它們不僅在物質(zhì)交換和血管通透性控制中發(fā)揮關(guān)鍵作用,還參與血管張力調(diào)節(jié)、血液凝固、炎癥反應(yīng)以及血管新生等過程。因此,內(nèi)皮細胞廣泛用于血栓形成、動脈粥樣硬化、炎癥、腫瘤血管生成等疾病機制的研究。
平滑肌細胞位于內(nèi)皮細胞下方的中層,主要功能是通過收縮與舒張調(diào)節(jié)血管管腔直徑,從而控制血壓和血流分布。平滑肌細胞在高血壓、動脈粥樣硬化、動脈瘤、支氣管哮喘、肺動脈高壓等疾病研究中廣泛應(yīng)用。
大鼠主動脈內(nèi)皮細胞分離培養(yǎng)試劑盒,英文名稱:Mouse Bone Marrow-Derived Macrophage Cells Isolation and Culture Kit;是普諾賽專為大鼠主動脈內(nèi)皮細胞研發(fā),試劑盒內(nèi)含大鼠主動脈內(nèi)皮細胞分離與提取所需的全套核心組分,并附帶詳細的操作說明書,開盒即用,方便高效。
使用普諾賽®大鼠主動脈內(nèi)皮細胞分離培養(yǎng)試劑盒獲取的細胞具有高純度、高活率以及典型的形態(tài)學(xué)特征,細胞狀態(tài)穩(wěn)定,貼壁生長良好,適用于各類后續(xù)實驗操作,具備良好的實驗重復(fù)性與一致性
使用普諾賽®血管類原代細胞提取試劑盒分離獲得的細胞貼壁性良好,狀態(tài)穩(wěn)定,具備典型的形態(tài)學(xué)特征。經(jīng)免疫熒光檢測證實,細胞特異性標志物呈陽性表達,細胞純度可達90%。該試劑盒分離的細胞,實驗重復(fù)性和結(jié)果一致性良好,適用于后續(xù)實驗操作。
試劑盒組分及用途簡述
清洗液:用于清洗血管組織,有效維持組織和細胞活性;并具抑菌作用,有助于降低污染風險。
內(nèi)皮細胞消化液(主動脈 / 肺大動脈):對血管組織的內(nèi)膜面進行消化,高效解離組織結(jié)構(gòu),獲得內(nèi)皮細胞懸液。
平滑肌細胞消化液:對血管平滑肌層組織進行消化解離,可充分解離組織塊,獲得單細胞懸液。
基礎(chǔ)培養(yǎng)基與添加劑:提供細胞生長所需的營養(yǎng)成分,并維持目標細胞的優(yōu)先生長。
鋪板工作液:促進細胞貼壁,提高細胞增殖效率。
細胞濾網(wǎng):物理過濾未完-全解離組織碎片和雜質(zhì),提高目標細胞純度。
血管類細胞提取與培養(yǎng)常見問題
Q:細胞純度不足
需徹-底清除血管表面的脂肪與結(jié)締組織;分離平滑肌細胞時,應(yīng)盡可能剝離外膜層和內(nèi)膜層組織;消化內(nèi)皮細胞時應(yīng)嚴格控制消化時間及組織塊大小(參考說明書組織塊大?。?,避免因過度消化而降低細胞純度。
Q:細胞得量少/活率低
細胞得率不足可能是因組織消化不充分,應(yīng)確保消化液配制和保存符合說明書要求,并嚴格控制消化時間。
細胞活率低常見于消化過度,建議在吹打組織時操作輕柔,適時終止消化過程;取材過程中應(yīng)快速操作,現(xiàn)取現(xiàn)用,并始終保持組織低溫以減少細胞損傷。
Q:內(nèi)皮細胞培養(yǎng)傳代要點
內(nèi)皮細胞相對較為脆弱,傳代次數(shù)有限,生長速度慢。初期培養(yǎng)3天內(nèi)細胞貼壁緩慢是正?,F(xiàn)象。可通過離心換液后接回原皿即可。傳代需在細胞匯合度達到80%以上,按1:2比例傳代處理,并優(yōu)先使用Accutase消化液進行消化;若無Accutase酶,可使用0.25%含EDTA的胰酶進行消化,嚴格控制好消化時間。